近年來，全球腎病的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。作為繼腫瘤、心臟病之后的第 三大“殺手”，醫(yī)務(wù)工作者在臨床診斷中卻很能難對早期腎病進(jìn)行確診。這主要是由 于患者在腎病早期癥狀不明顯，很容易延誤病情。另外，判斷腎臟損傷采用化驗(yàn)?zāi)?常規(guī)、滲透壓、血肌酐、尿素氮、內(nèi)生肌酐清除率等幾項(xiàng)指標(biāo)，但多數(shù)情況下當(dāng)這 些指標(biāo)增高時(shí)，很多腎臟損害已經(jīng)非常嚴(yán)重或已產(chǎn)生了不可逆的損傷，因此，尋找 能早期發(fā)現(xiàn)腎臟疾病的指標(biāo)已成為醫(yī)學(xué)界的熱點(diǎn)之一。 

目前，很多學(xué)者把尿 N-乙酰-β-D- 氨基葡萄糖苷酶（NAG 酶）活性作為 損傷的早期指標(biāo)，而最新的前沿研究 證明，除 NAG 酶之外，腎損傷分子-1 （kidney injury molecule-1, Kim-1）亦 能非常迅速、靈敏、特異地反映各種 腎臟疾病的損傷及恢復(fù)過程，為早期 腎損傷提供了另一種重要的檢測指 標(biāo)，該檢測指標(biāo)聯(lián)合 NAG 酶檢測早 期或急性腎損傷，具有準(zhǔn)確性高、特異性好、假陽性率低等優(yōu)點(diǎn)，因此在臨床上具 有廣闊的應(yīng)用前景。以下就腎損傷分子-1 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及相關(guān)檢測產(chǎn)品進(jìn)行具體介 紹。

腎損傷分子-1 是一種新型的 I 型跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白基因超家族。由 甲肝病毒受體-1（HAVcr-1）基因編碼，其蛋白結(jié)構(gòu)如圖 1 所示，胞外片段由一個(gè) 粘液素功能區(qū)連接一個(gè)由六個(gè)半胱氨酸組成的球蛋白樣功能區(qū)構(gòu)成。正常情況下， 腎臟組織幾乎不表達(dá) Kim-1 蛋白，但是在腎臟損傷后數(shù)小時(shí)內(nèi) Kim-1 的表達(dá)水平 即顯著升高。通過原位雜交和免疫組化分析發(fā)現(xiàn) Kim-1 主要表達(dá)于損傷后再生的 去分化近端腎小管上皮細(xì)胞，尤其在近端小管 S3 段豐富的外髓質(zhì)區(qū)域。 

為了使研究人員能更方便地研究 Kim-1 的功能并更準(zhǔn)確迅速檢測體內(nèi)外 Kim-1 的 蛋 白 水 平 ， Cloud-Clone Corp. 成功構(gòu)建了腎損傷分子 -1 胞 外 段 （Ser21~Ala240）的重組質(zhì)粒，并成功表達(dá)了 Kim-1 重組蛋白（RPA785Hu01）（如 圖 2 所示）。 

接著，優(yōu)爾生公司利用該重組蛋白，通過免疫動(dòng)物并采用親和層析的方法獲得 了高純度的人腎損傷分子-1（Kim-1）多克隆抗體 （PAA785Hu01）并通過 Western Blot 等方法檢測發(fā)現(xiàn)，該抗體可特異地結(jié)合 Kim-1 蛋白（如圖 3 所示）。此外， Cloud-Clone Corp.還成功開發(fā)了針對人 Kim-1 的檢測試劑盒 （SEA785Hu 和 SCA785Hu）。該試劑盒可定量檢測各種人體樣品，包括人組織勻漿、尿液、細(xì)胞 培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的 Kim1 含量。另外，優(yōu)爾生公司還開發(fā)了針對人 NAG 酶的檢測試劑盒（SED161Hu），方便實(shí)驗(yàn)人員同時(shí)檢測臨床樣品中的 Kim-1 和 NAG 酶含量，從而對病人的病情進(jìn)行更加準(zhǔn)確地分析。

此外，Cloud-Clone Corp.還開發(fā)了人腎損傷分子-1（Kim-1）的單克隆抗體 （MAA785Hu22）并進(jìn)行 IHC 檢測，結(jié)果顯示在腎炎患者的腎組織中可檢測到 Kim-1 的高水平表達(dá)，并且信號(hào)強(qiáng)烈表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞膜上，如圖 4 所示。接 著根據(jù)客戶需求，本公司對該單克隆抗體分別進(jìn)行了熒光素和生物素標(biāo)記，得到抗 體：PAA785Hu81 和 PAA785Hu71，這樣得到的單克隆抗體不僅能特異性識(shí)別 Kim-1，而且由于抗體帶有熒光或生物素標(biāo)記，可更方便直接對該蛋白進(jìn)行體內(nèi)外 檢測。

除以上產(chǎn)品外，Cloud-Clone Corp.公司還成功開發(fā)了針對小鼠及大鼠的 Kim-1 的相關(guān)產(chǎn)品。其具體信息如表 1 所示，這些產(chǎn)品為實(shí)驗(yàn)人員研究 Kim-1 的功能提 供了非常完善的技術(shù)平臺(tái)。

表 1. Kim-1 其它相關(guān)產(chǎn)品信息表