多因子檢測(cè)技術(shù)是一種基于流式熒光法的多重檢測(cè)技術(shù)，一次實(shí)驗(yàn)可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)分子，適用于蛋白質(zhì)、小分子、多肽等靶標(biāo)的檢測(cè)。相比傳統(tǒng)的單因子檢測(cè)方法，多因子檢測(cè)技術(shù)具有高通量、高靈敏度和特異性好的特點(diǎn)，同時(shí)還能節(jié)省樣本，提高檢測(cè)效率，有著廣泛的應(yīng)用前景。流式熒光法多因子檢測(cè)的免疫學(xué)原理與普通酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)相似，但信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)有所不同。多因子檢測(cè)也可以分為雙抗夾心和競(jìng)爭(zhēng)法。雙抗夾心法是通過(guò)將已知的抗體偶聯(lián)在熒光微球表面，待測(cè)抗原與偶聯(lián)的抗體反應(yīng)，加入生物素化的檢測(cè)抗體，形成雙抗夾心的結(jié)構(gòu)，最......

外泌體是一種直徑為30至150nm的膜分泌型囊泡狀結(jié)構(gòu)，其拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)與細(xì)胞類(lèi)似，并富含特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和多糖復(fù)合物。這些微小的細(xì)胞器由幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞產(chǎn)生并釋放，自然存在于多種體液中，如腦脊液、唾液、肺泡灌洗液、乳汁、尿液和血液等。外泌體的生成過(guò)程是通過(guò)細(xì)胞膜上的出芽方式進(jìn)行的，其中含有一系列與細(xì)胞膜密切相關(guān)的高階寡聚蛋白復(fù)合物，展現(xiàn)出顯著的分子異質(zhì)性。這一過(guò)程不僅是蛋白質(zhì)質(zhì)量控制的重要機(jī)制，而且外泌體在釋放到細(xì)胞外后，具備多重生物活性，如重塑細(xì)胞外基質(zhì)、向其他細(xì)胞傳遞信號(hào)和分子等。這種......

熒光素酶（luciferase）在一定條件下可以催化熒光素（luciferin），產(chǎn)生自發(fā)光現(xiàn)象（如圖1）。熒光素或熒光素酶不是特定的分子，而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱(chēng)。目前比較常見(jiàn)的有螢火蟲(chóng)熒光素酶、海腎熒光素酶，海螢熒光素酶等。螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶組成的雙報(bào)告系統(tǒng)在基因的表達(dá)調(diào)控、信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用、高通量藥物篩選、siRNA和miRNA篩選等多個(gè)研究領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。 圖1. 熒光素酶與熒光素的發(fā)光反應(yīng)螢火蟲(chóng)熒光素酶是目前研究中使用最為廣泛的熒光素酶。它由550個(gè)氨基酸組成，翻譯......

在Western Blot（WB）的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，總會(huì)遇到各種各樣的問(wèn)題：沒(méi)有條帶，雜帶多，轉(zhuǎn)膜不成功，曝光時(shí)間把握不好……WB實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，操作步驟繁瑣。怎么在繁瑣的操作中快速找到問(wèn)題所在是很多科研人員頭疼的問(wèn)題。不要急，云克隆用多年積攢的WB實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，為你分析解決WB實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的各種狀況。一、SDS-PAGE出現(xiàn)異常條帶1. 微笑現(xiàn)象可能原因：凝膠的中間部分凝固不均導(dǎo)致。解決辦法：待其充分凝固后再做實(shí)驗(yàn)。2.拖尾現(xiàn)象可能原因：樣品融解效果不佳；電泳緩沖液時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；分離膠濃度過(guò)大引起。解決辦法：加樣前離心；加適量樣品促溶......

疤痕很常見(jiàn)，在生活中磕磕碰碰就可能留下疤痕。然而疤痕一旦形成，則很難去除，目前醫(yī)學(xué)界仍無(wú)法完全消除疤痕。近期，有篇關(guān)于減少疤痕形成的研究登陸國(guó)際頂級(jí)期刊《Nature Communications》，為除疤提供了新的思路。 內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EndMT）是導(dǎo)致器官組織纖維化和疾病的主要原因，然而其機(jī)制尚未闡明。內(nèi)皮細(xì)胞具有強(qiáng)大的適應(yīng)和重組的再生能力，這是由于血管內(nèi)祖細(xì)胞（EVP）控制著內(nèi)皮細(xì)胞的層次結(jié)構(gòu)。通過(guò)分析，研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子SOX9和RBPJ特異性地影響小鼠EVP的數(shù)量和調(diào)節(jié)譜系特化。當(dāng)從小鼠血管系統(tǒng)（Sox9fl......

根據(jù)世界衛(wèi)生組織（World Health Organization, WHO）的統(tǒng)計(jì)，目前全球有超過(guò)3億人飽受抑郁的困擾。抑郁是一種情緒低落和悲觀厭世的狀態(tài)，就如同心理患上感冒，其主要癥狀表現(xiàn)為情緒低落、抑郁悲觀、反應(yīng)遲鈍、思考困難、記憶力下降、注意力不集中、食欲和睡眠時(shí)間顯著增加或減少等。而當(dāng)“心理感冒”加重時(shí)，患者會(huì)感到沮喪、絕望，甚至?xí)壬詺⒌哪铑^。每年有百萬(wàn)人因抑郁致死，且因抑郁癥死亡的人數(shù)呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)，抑郁癥目前已成為僅次于癌癥的第二大殺手。圖1. 21種抗抑郁藥的療效及耐受度坐標(biāo)圖(圖片來(lái)源：《Nature Neuros......

當(dāng)機(jī)體受到外來(lái)入侵者攻擊時(shí)，由免疫細(xì)胞組成的免疫系統(tǒng)能夠有效的防御外來(lái)入侵者。大家可能不知道，除了免疫細(xì)胞們，機(jī)體內(nèi)抵御病原體的逆行者們還有這幾種結(jié)構(gòu)細(xì)胞——成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。這些結(jié)構(gòu)細(xì)胞不僅僅是器官的支架，它們還能與免疫細(xì)胞進(jìn)行交流，參與抗病毒防御。Krausgruber等人在《自然》雜志上報(bào)道了一項(xiàng)對(duì)小鼠體內(nèi)多器官結(jié)構(gòu)細(xì)胞基因表達(dá)的檢測(cè)，揭示了這些細(xì)胞在機(jī)體防御外來(lái)入侵者的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中的作用，且結(jié)構(gòu)細(xì)胞對(duì)外來(lái)入侵者的防御反應(yīng)具有器官特異性。圖1通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，小鼠體內(nèi)的成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞......

工作生活加班加點(diǎn)，身上肥肉只增不減，沒(méi)邁開(kāi)腿？沒(méi)管住嘴？還是天要胖我，不得不胖？罪魁禍?zhǔn)卓赡苁墙裉斓闹鹘恰べ|(zhì)醇。皮質(zhì)醇，也稱(chēng)為“氫化可的松”，是腎上腺素分泌的糖皮質(zhì)激素，作為一種“應(yīng)激激素”，當(dāng)人體遇到危險(xiǎn)和緊急情況時(shí)，腎上腺素會(huì)瞬間分泌大量皮質(zhì)醇，促進(jìn)糖原分解消耗，生成葡萄糖，迅速給機(jī)體補(bǔ)充能量。不僅如此，它還能調(diào)節(jié)血壓、控制睡眠周期、提升注意力和記憶力。正常情況下，皮質(zhì)醇代謝有著固定的生理節(jié)奏（圖1），24小時(shí)一個(gè)周期，早晨6點(diǎn)到8點(diǎn)水平最高，上午8點(diǎn)到12點(diǎn)其水平會(huì)大幅度下降，之后持續(xù)地緩慢下......