近年來， 肥胖癥呈爆發(fā)性的上漲趨勢，由肥胖引發(fā)的代謝性疾病包括高血壓 病、冠心病、高血脂病、糖尿病、脂肪肝以及膽石癥等膽囊疾病的發(fā)病率也相應(yīng)明 顯增高，逐步成為全球性的主要健康問題之一。

據(jù)報道，脂肪組織作為分泌器官可分泌促炎性因子以及抗炎脂肪因子，這些因 子對于代謝健康有較好功效，而炎癥脂肪因子的分泌失調(diào)可能是照成人體肥胖的主 要原因。

分泌型卷曲相關(guān)蛋白 5（SFRP5）是一種新型的抗炎脂肪因子。屬于分泌型卷 曲相關(guān)蛋白（Secreted Frizzled Related Protein 5，SFRP5）家族成員。由于 SRRP5 可競爭性結(jié)合 Wnt5a 蛋白，抑制 Wnt 信號通路，同時抑制關(guān)鍵性的炎癥細胞（主 要是脂肪組織中的巨噬細胞）的激活，減少炎癥因子的分泌。SFRP5 作為肥胖和 其他代謝性疾病的鏈接點，深入研究 Sfrp5 和 wnt 信號通路中轉(zhuǎn)導(dǎo)分子之間相互作 用，也許能夠開啟研發(fā)治療與肥胖癥有關(guān)的代謝性疾病的新機會。

基于這一研究熱點，Cloud-Clone Corp.公司開發(fā)了一系列 SFRP5 重組蛋白，特 異性抗體以及定量檢測試劑盒等相關(guān)產(chǎn)品。具體的產(chǎn)品研發(fā)過程如下。

首先，Cloud-Clone Corp. 利用高通量的表達系統(tǒng)表達重組 SFRP5 重組蛋白 測序正確后，采用傳統(tǒng)的雙酶切與 Cloud-Clone Corp.自主構(gòu)建的大腸桿菌表達載體 pUSCNK-1 進行連接，并用于后期的蛋白表達。體外 IPTG 誘導(dǎo)表達，獲得重組蛋 白 ( 融 合 his-tag) ， 采 用 鎳 柱 純 化 ， 獲 得 純 化 后 的 重 組 蛋 白 （ RPC842Hu01, RPC842Hu02，RPC842Mu01, RPC842Mu02，RPC842Ra01）,通過 SDS-PAGE 驗證 蛋白純度（>95%）和分子量。以人重組蛋白 SFRP5（RPC842Hu01）為例 SDS-PAGE 驗證為例，結(jié)果如圖 1

將得到的重組蛋白（純度>95%），免疫小鼠，利用雜交瘤技術(shù)大批量制備單 克隆抗體，小鼠抗人 SFRP5（MAC842Hu22）及小鼠抗大鼠 SFRP5（MAC842Ra22）， 另外免疫家兔制備多克隆抗體兔抗人 SFRP5（PAC842Hu01 & PAC842Hu02）、兔 抗小鼠 SFRP5（PAC842Mu01 & PAC842Mu02）和兔抗大鼠 SFRP5（PAC842Ra01）， 抗體均采用親和層析法純化，特異性高獲得純化抗體后，通過 Western Blot 對其質(zhì) 量進行了已系列檢驗，以小鼠抗人 SFRP5 (MAC842Hu22)為例，結(jié)果如圖2所示。

將獲得的不同種屬的高純度的 SFRP5重組蛋白以及高特異性的抗體作為原料， Cloud-Clone Corp.自主研制出相應(yīng)的系列 SFRP5 ELISA 定量檢測試劑盒（貨號 SEC842Hu、HEC842Hu、SEC842Mu、SEC842Ra）。 方便廣大科研工作者準確定 量生物樣本中的蛋白含量，提供研究依據(jù)。科研學(xué)者們可以根據(jù)科研需要，對產(chǎn)品 進行選購。

SFRP5的相關(guān)定量產(chǎn)品獲得國內(nèi)外專家的認可，以下是使用產(chǎn)品發(fā)表的文獻。