VEGFA（Vascular Endothelial Growth Factor A），屬于血小板衍生生長(zhǎng)因子 家族，大量分布于人和動(dòng)物的腎臟、脾臟、肝臟、胰腺、骨骼和大腦等組織中。 VEGFA 可以和 VEGFR1、VEGFR2、Nrp1 以及 Nrp2 受體結(jié)合增加血管的通透 性，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移，減少腫瘤細(xì)胞的凋亡，同時(shí)對(duì)血管支持 物的生成有促進(jìn)作用。

VEGF-A mRNA 由 8 個(gè)外顯子和 7 個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成，經(jīng)交替剪切產(chǎn)生 7 種同 工型，9 種異構(gòu)體，主要包括以下六種：VEGF-A121、VEGF-A145、VEGF-A165、 VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206，右下角編號(hào)代表著各自的氨基酸個(gè)數(shù)， 其各個(gè)的氨基酸序列見(jiàn)圖 1。不同亞型均具有調(diào)節(jié)血管的功能，但由于氨基酸序 列的不同導(dǎo)致不同亞型在細(xì)胞中的定位以及生物活性不盡相同，它們的生物活 性與硫酸肝素蛋白多糖結(jié)合域的表達(dá)相關(guān)。

VEGF-A165，為堿性蛋白，既可分泌到細(xì)胞外也可結(jié)合到細(xì)胞表面或分泌到細(xì)胞 質(zhì)基質(zhì)，有硫酸肝素蛋白多糖結(jié)合域，具有最佳的生物利用度和生物潛能[1]。 VEGF-A121和 VEGF-A145呈弱酸性，是一種自由分布的蛋白，無(wú)硫酸肝素蛋白多 糖結(jié)合域，也不和細(xì)胞外基質(zhì)的糖蛋白結(jié)合。VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206堿性強(qiáng)于 VEGF-A165，主要分布在細(xì)胞外基質(zhì)中，與肝素有很強(qiáng)的親 和性。

為了方便研究人員研究 VEGFA 的功能并在體內(nèi)外檢測(cè) VEGFA 的蛋白含 量，Cloud-Clone Corp.公司開(kāi)發(fā)了一系列 VEGFA 的重組蛋白和抗體以及 ELISA 定量檢測(cè)試劑盒。VEGFA 相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)及面市，為廣大科研人員提供了系統(tǒng) 的 VEGFA 研究工具體系。

通過(guò)分析人VEGFA的重組蛋白（RPA143Hu01）分子量及純度的SDS-PAGE檢測(cè)如圖2。

用 RPA143Hu01 重組蛋白免疫小鼠，并通過(guò)親和層析等方法純化得到小鼠 抗人 VEGFA 單克隆抗體（MAA143Hu21）；免疫家兔獲得兔抗人 VEGFA 多克 隆抗體（PAA143Hu01）。將 PAA143Hu01 與生物素偶聯(lián)得到（PAA143Hu71）生 物素標(biāo)記抗體；與 FITC 偶聯(lián)得到（PAA143Hu81）FITC 標(biāo)記抗體，這兩種抗體 不僅能特異性識(shí)別 VEGFA，而且?guī)в袩晒饣蛏锼貥?biāo)記，可更方便直接對(duì)該蛋 白進(jìn)行體內(nèi)外檢測(cè)。這些抗體均已通過(guò) Western Blot 和 IHC 等方法進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證。 利用 PAA143Hu01 對(duì)血清樣本進(jìn)行 WB 檢測(cè)，結(jié)果如圖 2 所示。用人肝臟組織 進(jìn)行 IHC 檢測(cè)結(jié)果展示于圖 3 中，結(jié)果顯示在人肝臟組織中該蛋白主要集中表 達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中。

在VEGFA蛋白和抗體研發(fā)成功的基礎(chǔ)上，Cloud-Clone Corp. 研發(fā)了 VEGFA 檢測(cè)試劑盒，包括 Elisa 試劑盒（SEA143Hu）以及化學(xué)發(fā)光試劑 盒（SCA143Hu）。

除了人 VEGFA 的產(chǎn)品外，Cloud-Clone Corp.公司還成功開(kāi)發(fā)了針對(duì)大鼠、 小鼠、兔、狗等其它 6 個(gè)物種逾 40 種 VEGFA 相關(guān)產(chǎn)品，包括蛋白、抗體、生 物素和 FITC 偶聯(lián)抗體、Elisa 試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒等，這些產(chǎn)品為科研人 員研究不同物種中 VEGFA 的功能以及表達(dá)提供了非常完善的技術(shù)支持。

此外，為滿(mǎn)足研究者對(duì) VEGFA 的某一特定亞型開(kāi)展研究的需求， Cloud-Clone Corp.也針對(duì) VEGFA 不同的亞型進(jìn)行了相應(yīng)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，包括 VEGF-A121、VEGF-A145、VEGF-A165、VEGF-A183、VEGF-A189和 VEGF-A206 ， 其中包括不同物種的蛋白、抗體、生物素和 FITC 偶聯(lián)抗體、Elisa 試劑盒、化 學(xué)發(fā)光試劑盒等。在 Elisa 試劑盒研發(fā)過(guò)程中，Cloud-Clone Corp.公司通過(guò)對(duì)大 量抗體進(jìn)行?細(xì)篩選，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的交叉反應(yīng)性檢測(cè)，得到與其它各亞型均無(wú)交 叉反應(yīng)性的亞型特異