常見的蛋白表達(dá)方式有原核表達(dá)，真核表達(dá)兩種，其中真核表達(dá)系統(tǒng)又有三種，包括酵母表達(dá)系統(tǒng)，哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)和昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。原核表達(dá)系統(tǒng)以經(jīng)濟(jì)、高效著稱，但其缺乏翻譯后的加工機制，所以得到的蛋白有生物活性的幾率較??；昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)涉及到桿狀病毒的使用，具有局限性；酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)量高、易純化但是蛋白易降解且表達(dá)量不可控；哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)雖有接近機體天然形式的翻譯后加工機制，蛋白易保留生物活性，但又存在成本高、表達(dá)量低的缺點。

所以我們在構(gòu)建蛋白表達(dá)平臺時，同時建立了原核表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)，并針對需要保留生物活性的蛋白，還建立了哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)。在該系統(tǒng)中，還針對其表達(dá)量低的缺點進(jìn)行了優(yōu)化。應(yīng)用該系統(tǒng)表達(dá)蛋白時，我們進(jìn)行的優(yōu)化及產(chǎn)生的效果列于下表。

表1. 哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)的改進(jìn)和效果

以人成纖維細(xì)胞生長因子（RPB882Hu61）為例，該蛋白經(jīng)由哺乳動物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)量可達(dá)到約110mg/L，蛋白經(jīng)過純化后其純度約可達(dá)98%（圖1）。

圖1. 成纖維細(xì)胞生長因子SDS-PAGE檢測

（泳道1，2：純化的成纖維細(xì)胞生長因子蛋白，泳道3：分子量marker）

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