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各種組蛋白的體外檢測及提取技術(shù)

組蛋白(histones)是真核細胞核中染色質(zhì)中的強堿性蛋白質(zhì),是真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白。組蛋白將DNA進行壓縮并與DNA一起形成核小體,如果沒有組蛋白,染色體DNA解開,形成散亂的很長的DNA鏈。

組蛋白的研究具有非常重要的意義。體內(nèi)組蛋白的異常會導(dǎo)致許多疾病,如慢性腎病等。同時有關(guān)組蛋白的修飾與機體免疫調(diào)節(jié),自身免疫病,腫瘤,神經(jīng)系統(tǒng)疾病,以及內(nèi)分泌疾病都非常相關(guān)。

組蛋白有六種類型:H1、H2A、H2B、H3、H4及古細菌組蛋白,它們富含帶正電荷的堿性氨基酸,而DNA中主要帶負電荷,二者相互作用,使DNA纏繞在組蛋白上,形成DNA-組蛋白復(fù)合物。H2A,H2B,H3和H4被稱為核心組蛋白,而組蛋白H1和H5是已知作為連接體的組蛋白。核心組蛋白均以二聚體形式存在。

H2A ,H2B,H3,H4均是一種非特異性的蛋白,在人,大小鼠三個物種中均相同,故The Cloud-Clone. Corp. 針對這四個主要的組蛋白研發(fā)了多物種試劑盒。

SEA282Mi          ELISA Kit for Histone H2A (H2A)

SEA356Mi          ELISA Kit for Histone H2B (H2B)

SEA285Mi          ELISA Kit for Histone H3 (H3)

SEA289Mi          ELISA Kit for Histone H4 (H4)

由于組蛋白是一種核蛋白,故在做相關(guān)實驗如Elisa時,樣本的處理也格外重要,不合適的樣本處理會對實驗結(jié)果有很大影響。

對于組蛋白的提取可以提供如下配方,給研究者參考:

 50 mM Tris (pH 7.4), 300 mM NaCl, 10% (w/v)glycerol, 3 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 20 mM -glycerophosphate, 25 mM NaF, 1% TritonX-100, 25 ug/mL Leupeptin, 25 ug/mL Pepstatin, and 3 ug/mL Aprotinin.

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