內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)胞外膜成分，主要致病物質(zhì)是脂多糖（LPS），污染的空氣、職業(yè)性粉塵(谷物粉等)、香煙中到處都有LPS，職業(yè)性和環(huán)境性的吸人一定濃度的上述物質(zhì)后可引起或加重一系列臨床病癥，如哮喘、支氣管肺炎等。急性肺損傷（ALI）是指由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭，主要病理特征為由肺微血管通透性增高而導(dǎo)致的肺泡滲出液中富含蛋白質(zhì)的肺水腫及透明膜形成，并伴有肺間質(zhì)纖維化，嚴(yán)重的ALI可最終發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），目前其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)Wistar大鼠，雄性，體重為180g-220g。隨機(jī)分為對(duì)照組10只和模型組20只。

2.主要試劑

LPS（Sigma公司）

3.建模方法

脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的大鼠肺炎模型：將大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾靜脈后，按壓住尾靜脈1/3處，注射器進(jìn)針后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理鹽水，給藥劑量10mg/kg），從而建立內(nèi)毒素性急性肺損傷大鼠模型。正常對(duì)照組的大鼠做同樣的操作，但向尾靜脈注射等體積的生理鹽水。

4.模型的評(píng)價(jià)

4.1肺損傷后的大體觀察：

肺損傷后有肉眼可見肺部大面積出血滲出，可以直觀的反映肺損傷程度。

4.2肺的濕/干重比：

肺的濕/干重比是反應(yīng)肺水腫的直接指標(biāo)，也是反應(yīng)肺損傷嚴(yán)重程度的敏感指標(biāo)。在急性肺損傷（acute lung injury, ALI）發(fā)生后，大量液體滲出至肺泡和肺間質(zhì)，導(dǎo)致肺的重量增大，而肺的干重則不受影響。處死大鼠、剪斷氣管后取全肺，稱濕重，然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥，24h 后取出稱干重，計(jì)算肺濕/干重比值。

4.3肺損傷后的組織病理觀察 ：

取左肺4%多聚甲醛固定，然后將肺組織常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片（厚度為5μm），HE染色。HE染色肺組織學(xué)評(píng)價(jià)可以直觀的反應(yīng)肺損傷的程度，ALI組織病理學(xué)主要表現(xiàn)為肺泡中性粒細(xì)胞及紅細(xì)胞的滲出，肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍鏡下觀察到整個(gè)左肺組織的炎癥細(xì)胞浸潤、水腫以及損傷，評(píng)估肺部損傷分布情況；而高倍鏡下則可以對(duì)肺泡結(jié)構(gòu)進(jìn)行辨認(rèn)，對(duì)肺損傷程度進(jìn)行評(píng)估和評(píng)分。

評(píng)分方法：取6個(gè)視野進(jìn)行出血及水腫評(píng)分。

0分：沒有損傷

1分：<25%的損傷面積

2分：25%~50%的損傷面積

3分：50%~75%的損傷面積

4分：>75%的損傷面積

4.4標(biāo)志性炎癥因子表達(dá)水平的檢測：

左肺葉氣管解剖，行支氣管插管，預(yù)冷的(4度)無菌生理鹽水l ml進(jìn)行支氣管肺泡灌洗3次，共3 m1，回收支氣管肺泡灌洗液(BALF)至無菌離心管中， 1500 r／min，離心10 min，收集上清液，-80℃保存,使用ELISA試劑盒檢測肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-1β等細(xì)胞因子的含量。

4.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

　應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示有極顯著性差異。

結(jié)果分析

1、肺部組織形態(tài)觀察

2. 肺組織濕/干質(zhì)量比結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表1  2組大鼠肺組織濕/干質(zhì)量比（n=4 x ±ｓ）

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05

3. 病理結(jié)果分析

肺損傷6H后肺部HE染色， 

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