增值產(chǎn)品的介紹專題已經(jīng)持續(xù)了五期，不知道大家是否已對(duì)我們的增值產(chǎn)品有了大體的了解呢？寫(xiě)這個(gè)系列專題，初衷是為了幫助廣大客戶更好的理解我們的產(chǎn)品分類(lèi)，更方便、精準(zhǔn)的找到自己需要的產(chǎn)品。希望這個(gè)系列專題能對(duì)大家有所幫助。

那么今天繼續(xù)為大家介紹三個(gè)增值產(chǎn)品，分別是PCR預(yù)混液，細(xì)胞和組織裂解液，以及Protein A/G純化柱。

首先是PCR預(yù)混液；

PCR試劑是生物科研中需求最廣泛的試劑，涉及分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室?guī)缀醵家褂谩Ｄ壳癕aster Mix形式的產(chǎn)品，由于其使用的方便性，正逐漸成為主流的PCR試劑產(chǎn)品。武漢云克隆擁有一定的產(chǎn)品技術(shù)優(yōu)勢(shì)，建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品生產(chǎn)、質(zhì)控體系，可保證我們的產(chǎn)品擁有穩(wěn)定的質(zhì)量和良好的用戶體驗(yàn)。

PCR Mix System 采用的是2倍濃度的PCR體系預(yù)混液，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、標(biāo)準(zhǔn)Taq酶反應(yīng)緩沖液、酶穩(wěn)定劑和溴酚藍(lán)染料，適用于常規(guī)的PCR使用。使用時(shí)，加入模板和引物就能快捷、方便的配置好PCR反應(yīng)體系。PCR Mix System含溴酚藍(lán)染料，PCR完成后可以直接電泳，大大簡(jiǎn)化了操作過(guò)程，能節(jié)省時(shí)間，減少實(shí)驗(yàn)中的污染和操作誤差。

應(yīng)用范圍：

1. 常規(guī)PCR擴(kuò)增；2. DNA各種標(biāo)記，如同位素和biotin標(biāo)記等；DNA測(cè)序；3. 基于PCR技術(shù)的基因掃描；4. 該體系擴(kuò)增的產(chǎn)物3′端帶A，可直接用于T/A 載體克隆。

其次是細(xì)胞和組織裂解液；

細(xì)胞裂解液可使細(xì)胞分裂，從而提取需要的內(nèi)容物。主要目的是：1.利用去污劑破壞脂質(zhì)雙分子層，破裂細(xì)胞；2. 溶解蛋白；3. 蛋白變性使其穩(wěn)定；4. 抑制蛋白酶活性。

裂解緩沖液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞的緩沖液，由表面活性劑、蛋白酶抑制劑等多種成分構(gòu)成，主要用于細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)的提取。我們對(duì)傳統(tǒng)裂解液配方進(jìn)行優(yōu)化，研制出了幾種不同的裂解緩沖液。本產(chǎn)品對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核等成分均有較溫和的裂解作用，以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的最大釋放和對(duì)目的蛋白的最小損傷，從而應(yīng)用于后續(xù)的目標(biāo)蛋白提取、ELISA、Western Blot等實(shí)驗(yàn)。我司建議每107個(gè)細(xì)胞/50mg組織使用1ml裂解液。

裂解液的種類(lèi)及其功能展示如下：

最后是Protein A/G純化柱。

本產(chǎn)品采用了重組表達(dá)的Protein A將Protein A與溴化氫活化的顆粒狀瓊脂糖凝膠偶聯(lián)制成Protein A預(yù)裝柱，能夠特異性地結(jié)合多種免疫球蛋白的Fc區(qū)段，作為親和樹(shù)脂，可用來(lái)純化不同來(lái)源的抗體和抗體亞型，以及在免疫共沉實(shí)驗(yàn)中捕獲免疫復(fù)合物。本產(chǎn)品使用了多位點(diǎn)交聯(lián)技術(shù)，穩(wěn)定性好、特異性高并具有廣譜結(jié)合力，每ml基質(zhì)可特異性結(jié)合5-10毫克抗體。例如：抗血清中含有針對(duì)免疫用抗原的特異性抗體外，還有大量雜蛋白、多糖和其他血液成分。此時(shí)可以用Protein A/G純化柱將抗血清中非抗體成分去除。而且，自己制備的抗體，在做Western Blot的時(shí)候，經(jīng)常出現(xiàn)背景高，膠片壓的時(shí)間稍長(zhǎng)便模糊不堪，此時(shí)往往也需要進(jìn)一步純化。

通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)整理，我們總結(jié)了protein A/G純化柱使用過(guò)程中常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題，并針對(duì)每個(gè)問(wèn)題，給出了相應(yīng)的解決辦法。希望能對(duì)您的使用有所幫助：

1. 用蛋白A或蛋白G柱遇到的常見(jiàn)問(wèn)題是個(gè)別來(lái)源的抗體不能很好的結(jié)合到樹(shù)脂上。此種情況建議提高結(jié)合和洗滌使用的緩沖液鹽濃度。蛋白A或蛋白G與抗體的Fc段的相I作用主要是通過(guò)疏水作用，加入高濃度鹽有助于它們的相互作用而增加結(jié)合力。

2. 收集的抗體可能被低pH值的洗脫液破壞。不同種屬或不同亞類(lèi)的抗體應(yīng)以不同pH值的酸性溶液洗脫。上述方法用pH值相同的洗脫液，除了少數(shù)情況外，還是可行的。然而，亦可使用pH值不太低的酸性洗脫液。可用同一試劑逐漸降低其pH值，以決定洗脫目的抗體所需的最溫和條件。

3. 抗體純化柱可以多次反復(fù)使用，但在分析研究中，用同一親和柱純化2種或2種以上抗體時(shí)應(yīng)非常小心，因?yàn)椴煌目贵w與蛋白A或蛋白G的親合力不同，而抗體和柱子之間結(jié)合緊密，酸洗脫并不能完全洗去結(jié)合上的免疫球蛋白，這樣很容易使某種抗體被親和柱中殘余的抗體污染，產(chǎn)生交叉反應(yīng)。至于大樣品純化，建議對(duì)于相同來(lái)源的抗體使用固定的親和柱。

今天的介紹暫告一段落，之后將向大家介紹各種定制服務(wù)，還望大家多多期待。

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