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細(xì)胞自噬標(biāo)志物L(fēng)C3

一年一度的諾貝爾獎(jiǎng)如期拉開帷幕,2016年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了日本科學(xué)家大隅良典,以表彰他對(duì)細(xì)胞自噬機(jī)理的發(fā)現(xiàn)。早在上世紀(jì)50年代,比利時(shí)科學(xué)家杜夫通過電鏡觀察到自噬體結(jié)構(gòu),并首先提出了“自噬”這種說法。

自噬是一個(gè)吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡,并與溶酶體融合形成自噬溶酶體,降解其所包裹的內(nèi)容物的過程,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞器更新。這個(gè)過程以溶酶體封閉小室為終點(diǎn)結(jié)束。圖1即形象地描述了細(xì)胞自噬的機(jī)理。通俗地說,細(xì)胞可以通過降解自身的非必需成分來提供能量和營(yíng)養(yǎng),也可以降解一些毒性成分以阻止細(xì)胞損傷和凋亡。目前的檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)是通過電鏡觀察膜狀結(jié)構(gòu)的自噬體以及檢測(cè)自噬標(biāo)志物L(fēng)C3。雖然電鏡可直接觀察到自噬,但由于需要電鏡設(shè)備和一定的實(shí)驗(yàn)技能,其無法滿足所有研究者的需要,所以更常見的是檢測(cè)自噬標(biāo)志物L(fēng)C3。理解細(xì)胞自噬對(duì)認(rèn)識(shí)衰老、分化及發(fā)育、免疫及清除微生物、腫瘤等疾病的病理生理過程有重要意義。

圖 1. 細(xì)胞自噬機(jī)理的模式圖 (源引自:Nobelprize.org Database)

LC3最初發(fā)現(xiàn)時(shí)被認(rèn)為是微管關(guān)聯(lián)蛋白1A和1B (microtubule- associated proteins 1A and 1B),被稱為MAP1LC3,隨后發(fā)現(xiàn)LC3與酵母蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有較高相似性,并在自噬過程中起重要作用。哺乳動(dòng)物中LC3有3種亞型,包括LC3A、LC3B和LC3C,它們?cè)谧允蛇^程中存在相關(guān)的翻譯后修飾。自噬發(fā)生過程中,LC3蛋白合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,產(chǎn)生細(xì)胞漿定位的LC3-I。在自噬過程中,LC3-I會(huì)被包括Atg7和Atg3在內(nèi)的泛素樣體系所修飾和加工,產(chǎn)生分子量為14kD的LC3-II,并定位到自噬小體中。這樣,自噬小體中存在的LC3和LC3-II都被當(dāng)做細(xì)胞發(fā)生自噬的分子標(biāo)志,并且LC3-II的含量和發(fā)生自噬的程度成正比,C3-II/I比值的大小可估計(jì)自噬水平的高低。由于LC3A作為L(zhǎng)C3的一種,同樣可以用作自噬的分子標(biāo)志物。

云克隆公司開發(fā)了針對(duì)LC3A的重組蛋白(RPL701Hu01、RPL701Ra01)、抗體(MAL701Hu21、 MAL701Ra21、PAL701Hu01PAL701Ra01)以及ELISA試劑盒(SEL701Hu、SEL701Ra),可供廣大科研工作者選擇使用,為科研用戶研究自噬相關(guān)機(jī)制提供了良好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

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