隨著基因工程抗體的研發(fā)，scFv（single-chain fragment variable）在理論和實際應用方面的研究引起了越來越廣泛的關注。與經(jīng)典抗體分子相比，scFv具有分子量?。s占完整抗體分子的1/6）的特征，也被認為是具有抗體生物活性的最小功能單位。scFv是由抗體重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)通過15～20個氨基酸的短肽連接而成，不含F(xiàn)c片段，屬于小分子基因工程抗體。scFv最早是在酵母和植物細胞中成功表達并獲得，能夠自發(fā)折疊，形成天然結(jié)構，具有抗原結(jié)合特性。scFv在抗病毒、腫瘤治療、自身免疫病治療，靶向藥物治療等等方面有巨大的應用前景。

scFv具有抗原結(jié)合特性、穿透力強、體內(nèi)半衰期短、免疫原性低、可在原核細胞系統(tǒng)表達以及易于進行基因工程操作等特點，對其開展的研究也是異常火熱。目前多使用的是噬菌體表面展示技術制備scFv，制備過程如下：

1.抗體基因的克隆及重組。一般利用抗體可變區(qū)基因骨架區(qū)的特異性簡并引物，通過PCR擴增出抗體重鏈和輕鏈可變區(qū)的基因，通過接頭linker拼接成完整的scFv基因。

2.抗體基因表達載體的構建及表達。擴增成功的scFv基因轉(zhuǎn)入噬菌粒載體，并轉(zhuǎn)化宿主細胞，構建噬菌體單鏈抗體庫。

3.噬菌體單鏈抗體庫的富集、篩選。通常是用固相化的抗原與噬菌體抗體庫孵育，通過數(shù)次吸附、洗滌、洗脫、擴增過程，可使特異的噬菌體得到109的富集，每一個噬菌體代表了一個抗體。

4.scFv單鏈抗體的可溶性表達。在單鏈抗體基因構建中，單鏈抗體基因C末端可引入c-Myc、組氨酸、GST、MBP、脂類標簽等，使表達產(chǎn)物更易于檢測和純化。

Cloud-Clone Corp.經(jīng)過多年的努力，已初步建立并擁有完整的單鏈抗體scFv制備平臺（如圖所示）。

Cloud-Clone Corp.打破傳統(tǒng)單克隆和多克隆抗體制備工藝的限制，可為科研型客戶和工業(yè)級客戶提供最為優(yōu)秀和全面的抗體制備服務。更多產(chǎn)品信息，請點擊訪問：www.cloud-clone.com。