蛋白活性實(shí)驗(yàn)-巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP1a)
巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1-α也稱為趨化因子配體3（CCL3），是屬于CC趨化因子家族的細(xì)胞因子，它主要參與巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的募集和活化。
活性實(shí)驗(yàn)：本實(shí)驗(yàn)采用24孔微趨化系統(tǒng)進(jìn)行趨化性測定，以評(píng)價(jià)MIP-1a對(duì)人單核細(xì)胞株THP1的趨化作用。分別在上室接種THP1細(xì)胞（100ul細(xì)胞懸浮液，含0.5％FBS的RPMI 1640，細(xì)胞數(shù)量10 6細(xì)胞/ ml），在下室添加MIP-1a（用無血清RPMI 1640稀釋至100ng / ml）并在下室中加入用于分離兩個(gè)隔室的聚碳酸酯過濾器（8um孔徑）。37℃，5％CO 2下孵育5h后，取出濾膜，倒置顯微鏡低倍鏡下（100倍）觀察低室細(xì)胞遷移情況，并以高倍數(shù)（400倍）隨機(jī)計(jì)數(shù)遷移細(xì)胞數(shù)（每個(gè)過濾器中的五個(gè)區(qū)域）
結(jié)果：通過高倍鏡下（400倍）隨機(jī)計(jì)數(shù)低室遷移細(xì)胞數(shù)，顯示平均41.2個(gè)THP1細(xì)胞/區(qū)域遷移到具有100ng / ml MIP-1a的無血清RPMI 1640培養(yǎng)基中，而僅有3.6個(gè)THP1細(xì)胞/區(qū)域遷移到無血清RPMI 1640培養(yǎng)基中。由此可知該蛋白擁有生物學(xué)活性。低倍鏡下（100倍）遷移的THP1細(xì)胞如圖1所示。
A B
圖1.MIP-1-α對(duì)THP1細(xì)胞的趨化作用
(A)將THP1細(xì)胞接種到上腔，并在下腔室加入100ng / ml MIP-1a的無血清RPMI 1640，孵育5h后以低放大倍數(shù)（100倍）觀察下室細(xì)胞;
(B) 將THP1細(xì)胞接種到上腔中，并在下腔室中加入無血清RPMI 1640，未加MIP-1a，孵育5h后，以低放大倍數(shù)（100倍）觀察下室細(xì)胞。