分析原因

解決方法

試劑盒保存不當(dāng)，導(dǎo)致試劑部分或完全失效。

請按說明書要求保存試劑盒。檢測液 A、檢測液 B、標(biāo)準(zhǔn)品以及酶標(biāo)條等儲存在-20 ^oC，而其它試劑需儲存在 4 ^oC。

樣本反復(fù)凍融，樣本反復(fù)凍融會導(dǎo)致樣本中蛋白降解。

收集樣本制備后，需進行分裝后凍存-20^oC或-80^oC，避免樣本反復(fù)凍融。

樣本保存不當(dāng)或保存時間過長。長時間的儲存有可能導(dǎo)致目標(biāo)蛋白的降解， 致使檢測結(jié)果不理想。

建議使用新鮮的樣本。標(biāo)本均需密封保存，4^oC 保存小于 1 周，-20^oC 不超過 1 個月，-80^oC 不超過 2 個月。

樣本稀釋過度以及稀釋不足均有可能導(dǎo)致樣本的測值低。稀釋過度，導(dǎo)致樣本中靶分子含量太低而出現(xiàn)測值低現(xiàn)象；稀釋不足，樣本中抗原過量會出現(xiàn)后帶效應(yīng)。即當(dāng)樣本中目標(biāo)物含 量很高，而沒有進行正確的稀釋，就有可能會導(dǎo)致假陰性反應(yīng)。

血清血漿樣本可參考試劑盒推薦的稀釋倍數(shù)進行實驗。其它生物樣本，樣本收集和制備過程中影響因素太多，建議做預(yù)實驗確定樣本稀釋倍數(shù)。可參考文獻，將樣本進行梯度稀釋，最后選取樣本 O.D.值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線中間位置的 點的稀釋倍數(shù)。

分析物在樣品中本身濃度偏低。大多數(shù)細胞因子在正常情況下表達量很低，如 IL-6 需在炎癥刺激情況才會大量產(chǎn)生，一般非炎癥樣本或未刺激處理樣本測值會非常低。

建議根據(jù)文獻選取適合的刺激方案。對于這些細胞因子，云克隆除了驗證血清血漿樣本（多數(shù)陰性），也會驗證未處理的細胞上清（多數(shù)陰性）和刺激處理后細胞上清樣本（陽性樣本）。而且云克隆推出了高敏試劑盒，以提高樣本中細胞因子的檢出率。