HRP-SA即辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素（SA），由HRP和SA交聯(lián)形成，常被作為信號放大器用于生物素化分子的檢測，包括生物素化核酸、蛋白、抗體等，可提高檢測靈敏性。

SA是一個(gè)四聚體蛋白，由4條相同的肽鏈組成，分子量為52.8kDa。1個(gè)SA可以高度特異地與4個(gè)生物素（Biotin）結(jié)合。SA與雞蛋清來源的親和素（Avidin）相比，非特異性結(jié)合低很多，這是由于SA不含糖基且等電點(diǎn)接近中性。因?yàn)?/span>SA具有比Avidin低的非特異性背景，故而應(yīng)用更為廣泛。

HRP穩(wěn)定、分子量小、容易制備，當(dāng)它與底物孵育時(shí)，能產(chǎn)生一種著色、熒光或發(fā)光標(biāo)記的分子衍生物，因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域的檢測。

目前，云克隆建立了成熟的原核發(fā)酵技術(shù)，可進(jìn)行高純度（≥95%）SA的大量生產(chǎn)。同時(shí)，結(jié)合已有的HRP交聯(lián)技術(shù)平臺，我們已完成HRP-SA的工業(yè)化批量生產(chǎn)。HRP-SA可以在兩個(gè)領(lǐng)域內(nèi)大量應(yīng)用，一是作為體外診斷（IVD）試劑信號放大系統(tǒng)的通用試劑，二是作為科研試劑（ELISA、WB、IHC、Southern等）的顯色系統(tǒng)中信號放大系統(tǒng)的通用試劑。

針對SA的活性，我們通過Green改良法進(jìn)行了活性檢測，并和其他來源的SA活性進(jìn)行了比較，結(jié)果如下：

對于交聯(lián)后的HRP-SA的穩(wěn)定性及在各種實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)，檢測數(shù)據(jù)展示如下：

（1）穩(wěn)定性檢測

     將即用型HRP-SA于37度分別放置0天、3天和7天，使用GAPDH成品檢測試劑盒（貨號：SEB932Hu）進(jìn)行ELISA檢測，結(jié)果如下：

（2）IHC檢測

對人乳房組織進(jìn)行微波抗原修復(fù)預(yù)處理，接著加入濃度為5μg/ml抗PCNA抗體（貨號：CAA591Hu22）進(jìn)行孵育。孵育后添加1μg/ml生物素標(biāo)記山羊抗鼠二抗（貨號：SAA544Mu17），緊隨其后加入1μg/ml的HRP-SA。采用DAB作為顯色劑，組織切片用蘇木精復(fù)染，用樹脂封閉后鏡檢，結(jié)果如下：

（3）ELISA檢測

板底預(yù)包被抗OVA抗體（貨號：MAB459Ge21）濃度為2μg/ml，添加OVA，初始濃度為50ng/ml，依次倍比稀釋。稍后添加1μg/ml Biotin標(biāo)記的抗OVA抗體（貨號：LAB459Ge71）。最后添加1μg/ml的HRP-SA進(jìn)行顯色讀數(shù)，結(jié)果如下：

完成這些基本檢測后，我們還將不同廠家的HRP-SA在ELISA實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)進(jìn)行了對比。

（1）使用GAPDH成品檢測試劑盒（貨號：SEB932Hu）中除檢測液B外的其他試劑和3種不同來源的HRP-SA進(jìn)行ELISA檢測，結(jié)果如下：

（2）任選了10個(gè)不同指標(biāo)成品檢測試劑盒中的除檢測液B外的其他試劑和2種不同來源的HRP-SA進(jìn)行ELISA檢測，結(jié)果如下：

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