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緩沖液對于蛋白的影響

蛋白質(zhì)的分離和純化是一項(xiàng)復(fù)雜的任務(wù),每一種蛋白的純化過程都不完全相同,因此在蛋白提取和制備過程中使用適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)純化方法,才能獲得穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。在整個(gè)過程中,蛋白質(zhì)的穩(wěn)定取決于所使用的多組分緩沖體系,最佳條件就是既可以溶解蛋白質(zhì),又可以保持生物活性。由于大部分的蛋白質(zhì)純化均在體外進(jìn)行,所以目前市面上重組蛋白對應(yīng)的緩沖系統(tǒng)可能地模擬天然蛋白質(zhì)在體內(nèi)的條件以期達(dá)到蛋白穩(wěn)定保存和運(yùn)輸?shù)哪康摹?/span>

緩沖液的主要作用是為目標(biāo)蛋白質(zhì)提供最適的環(huán)境。在選擇和配制緩沖液的過程中,必須考慮以下幾個(gè)因素

1. 緩沖液成分:緩沖液本身的緩沖成分不應(yīng)與蛋白質(zhì)發(fā)生相互作用。例如,一些酶被磷酸鹽緩沖液的磷酸鹽基團(tuán)抑制,會導(dǎo)致蛋白的功能缺失。也說明每種蛋白質(zhì)適合的緩沖液不完全相同,因此用戶溶解蛋白時(shí)應(yīng)盡量選擇說明書推薦的緩沖液以最大程度保證蛋白的穩(wěn)定性和相應(yīng)對活性。典型的緩沖液濃度范圍為20至100mM,并且可能需要向離子強(qiáng)度敏感的蛋白質(zhì)或鎂等金屬離子等添加其他成分(鹽溶液為150mM),這對于某些酶是有活性的而言是必需的。

2. 酸堿度:pH取決于蛋白質(zhì)的實(shí)際應(yīng)用。如果使用蛋白質(zhì)進(jìn)行某種類型的生物測定,例如酶測定,應(yīng)選擇酶顯示最佳活性的pH。當(dāng)制備用于純化技術(shù)的蛋白質(zhì)(離子交換,凝膠過濾等)時(shí), pH應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件來選擇,以獲得最大的純化效率。當(dāng)不需要特定的pH時(shí),蛋白質(zhì)表現(xiàn)出最佳穩(wěn)定性的pH就是最好的,這一點(diǎn)對于蛋白質(zhì)的儲存尤其如此。

 

云克隆目前可向用戶提供超11000種蛋白(包括活性蛋白),對于這么多蛋白,我們也有對應(yīng)的各類緩沖系統(tǒng)用于保護(hù)蛋白。其中最為常見的是磷酸鹽緩沖體系和tris緩沖體系,最近有很多用戶關(guān)于蛋白緩沖液的咨詢,我們都為用戶一一進(jìn)行了解答。如果您也有關(guān)于蛋白緩沖液方面的疑慮,比如是否能夠更換蛋白緩沖液,如何配置蛋白緩沖液等問題,歡迎您來電或留言互動(dòng)哦!

 云克隆部分緩沖液產(chǎn)品展示:

編號

名稱

規(guī)格

IS045-1

PBS緩沖溶液(干粉) (0.01M,pH7.2-7.6)

1袋/1盒(12袋)

IS045-2

TRIS緩沖溶液(干粉) (0.02M,pH8)

1袋/1盒(12袋)