IGF1活性蛋白的促細胞增殖作用
胰島素樣生長因子1(IGF1),又稱生長調(diào)節(jié)素C,是一種在分子結構上類似于胰島素但其促生長活性更強于胰島素的低分子肽。
據(jù)報道,IGF1能誘導多種細胞的增殖、遷移和分化,其中包括人乳腺癌細胞系MCF7。本實驗通過觀察IGF1活性蛋白對MCF7細胞系的促增殖作用來評估IGF1蛋白的活性。
實驗方案:
1. 將MCF-7細胞接種到96孔板中,接種3復孔,調(diào)整每孔細胞數(shù)2000個,培養(yǎng)過夜待細胞貼壁;
2. 更換為無血清的DMEM培養(yǎng)基,并加入不同濃度的IGF1蛋白,培養(yǎng)72小時;
3. 在倒置顯微鏡下觀察細胞增殖的情況,并用CCK-8試劑盒進行細胞增殖的檢測(每孔加入10微升CCK-8溶液,加入CCK8后,避光37℃孵育1-4小時后,酶標儀檢測波長為OD450 nm處吸光度值)
實驗結果:
圖 1. IGF1蛋白刺激MCF-7細胞的增殖
A. MCF-7細胞以10ng/ml IGF1蛋白刺激72小時后;
B. MCF-7細胞未加刺激。
圖 2. IGF1蛋白對MCF-7細胞增殖的劑量效應曲線
實驗結論:
云克隆IGF1活性蛋白可明顯刺激MCF-7細胞的增殖。
參考信息:
云克隆IGF1活性蛋白貨號:APA050Hu61