巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF），也稱為CSF-1，是一種分泌型細(xì)胞因子，它可以影響造血干細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞或其他相關(guān)細(xì)胞。 M-CSF是造血生長因子，參與單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和骨髓祖細(xì)胞的增殖，分化和存活。它還通過吞噬和趨化活性影響巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞，并增加了腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性。M-CSF的作用不僅限于單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，通過與膜受體相互作用（C-fms編碼的CSF1R或M-CSF-R原癌基因），M-CSF還可以調(diào)節(jié)早期造血細(xì)胞的增殖，并影響多種免疫、新陳代謝、生育能力和懷孕相關(guān)的生理過程。此外，巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體（M-CSF-R）被確定與M-CSF能交互反應(yīng)，因此可通過結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附測定以檢測重組人M-CSF和重組人MCSFR的結(jié)合力。

簡而言之，將M-CSF在含有0.01％BSA（pH 7.4）的PBS中連續(xù)稀釋，然后將不同濃度的M-CSF加入包被有M-CSF-R的微孔中，并在37℃孵育2小時。用PBST洗滌孔，并與抗M-CSF的抗體孵育1h，棄去液體并洗凈3次。與HRP標(biāo)記的二抗體孵育后，棄去液體并洗凈3次。加入底物液50uL，將微孔板在37℃下孵育15-25分鐘。最后，加入50μL中止液并立即在450nm讀取。M-CSF和M-CSF-R的結(jié)合活性如下圖所示：

以上使用的活動蛋白信息為：

巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）：APA090Hu01

巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體（M-CSF-R）：RPB484Hu01