基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix Metalloproteinase）是一組具有多種共同生化性質(zhì)的可以降解細(xì)胞外基質(zhì)的酶，它們參與正常生命過程中結(jié)締組織的再造?；|(zhì)金屬蛋白酶的降解作用在中性pH條件進(jìn)行，需要有內(nèi)在的Zn2+離子和外在的Ca2+離子存在；且酶活能被螯合劑和金屬蛋白酶的組織抑制因子（Tissue Inhinbitor of Metalloproteinase，TIMP）所抑制。 基質(zhì)金屬蛋白酶13（MMP13）是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的成員，研究表明MMP13參與與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)的聚集蛋白聚糖降解，骨關(guān)節(jié)炎軟骨移植物中II型膠原蛋白的裂解，以及腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。另外，MMP13還可以切割I(lǐng)，III，IV，IX，X和XIV型膠原蛋白和纖連蛋白。MMP13在細(xì)胞外基質(zhì)降解和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用的調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用。 我們使用明膠酶譜法檢測(cè)了MMP13的活性。具體步驟如下： 1.制備不同濃度的MMP13，1000ng，500ng，250ng，125ng； 2.向不同濃度的MMP13中加入用SDS上樣緩沖液； 3.在非還原條件下，將不同濃度的MMP13和陰性對(duì)照（熱變性的MMP13）上樣電泳，使用含明膠（1mg / mL）的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE，10％凝膠）； 4.復(fù)性，孵育，CCB染色。 結(jié)果：活性MMP13會(huì)水解凝膠中的明膠，由凝膠上的白色條帶指示。 重組MMP13的明膠水解如圖1所示。

實(shí)驗(yàn)所使用的MMP13活性蛋白：APA099Hu01，Cloud-Clone。