活性蛋白巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β的促趨化作用
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β（Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta, MIP-1β），又稱CCL4，主要與CCR5受體特異性結(jié)合的趨化因子，能特異性趨化淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞向炎癥部位遷移。本實(shí)驗(yàn)通過檢測MIP-1β對人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞系Jurkat的趨化作用來評估人重組MIP-1β蛋白的活性。
實(shí)驗(yàn)方案：
將100uL Jurkat細(xì)胞懸液（5×105 cells/mL in RPMI 1640 with FBS free）鋪板與培養(yǎng)小室上室，不同濃度的人重組MIP-1β蛋白（0.0001ng/mL, 0.001ng/mL, 0.1ng/mL, 1ng/mL, 10ng/mL, 100ng/mL diluted separately in serum free RPMI 1640）置于培養(yǎng)小室下室，兩室之間使用聚碳酸酯濾膜隔開，孵育2h后，移除濾膜并在倒置顯微鏡下觀察并計數(shù)細(xì)胞遷移數(shù)。顯微鏡下觀察遷移的Jurkat細(xì)胞如下圖：
A. Jurkat細(xì)胞接種于上室，0.01ng/mL的 MIP-1β重組蛋白溶于無血清的1640培養(yǎng)基中置于下室，共培養(yǎng)2h后，倒置顯微鏡下觀察下室的細(xì)胞。
B. Jurkat細(xì)胞接種于上室，無血清的1640培養(yǎng)基中置于下室，共培養(yǎng)2h后，倒置顯微鏡下觀察下室的細(xì)胞。
結(jié)論：
人重組MIP-1β蛋白能促進(jìn)Jurkat細(xì)胞的趨化作用。
產(chǎn)品信息：http://www.cloud-clone.com/products/APA093Hu02.html