文獻(xiàn)導(dǎo)讀

2021年5月13日，來自美國德州大學(xué)安德森癌癥中心的Mien-chie Hung和Dihua Yu教授在《Nature Communications》上聯(lián)合發(fā)表了題為“Human ribonuclease 1 serves as a secretory ligand of ephrin A4 receptor and induces breast tumor initiation”的文章。

研究介紹

人核糖核酸酶1（hRnase1）是清除細(xì)胞外RNA的關(guān)鍵酶，可以維持體內(nèi)穩(wěn)態(tài)以及宿主防御。雖然hRnase1的生化成分和轉(zhuǎn)錄后修飾等過程已經(jīng)有所了解，但是對其生物學(xué)功能的研究還不夠透徹，尤其是癌癥方面。近來研究發(fā)現(xiàn)，Rnase和受體酪氨酸激酶（RTKs）在胰腺癌和肝癌中存在新的配體-受體關(guān)系。作者研究發(fā)現(xiàn)hRNase 1–EphA4這對新的配體-受體對在乳腺癌的發(fā)生中起著重要作用。

首先，為了系統(tǒng)地識別hRnase超家族成員對于癌癥發(fā)展的作用，作者使用Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫對患者進(jìn)行分層分析。結(jié)果顯示，只有hRnase1與乳腺癌患者生存期呈顯著負(fù)相關(guān)。此外，在2級腫瘤中，較高的hRNase 1表達(dá)與較差的生存狀況顯著相關(guān)。與淋巴結(jié)陽性轉(zhuǎn)移患者相比，在淋巴結(jié)陰性非轉(zhuǎn)移乳腺癌患者中，hRNase 1似乎是更顯著的不良預(yù)后因素。在乳腺癌的四種分子亞型中，hRNase 1和管腔A、管腔B亞型乳腺癌患者的生存率呈負(fù)相關(guān)。為了進(jìn)一步研究hRNase1在乳腺癌中的作用，作者使用乳腺腫瘤組織芯片(breast tumor tissue microarray, TMA)檢測腫瘤組織，發(fā)現(xiàn)hRNase1在乳腺腫瘤（T）中的平均表達(dá)水平明顯高于正常乳腺組織（N），血清中的表達(dá)水平同樣如此。這些結(jié)果表明，乳腺癌患者組織和血清中hRNase1水平高于正常個(gè)體。

作者在MCF7管腔A乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)hRNase1，發(fā)現(xiàn)hRNase1顯著增加了原代、繼代和三代中球體形成的數(shù)量。此外，hRNase1在MCF7母代細(xì)胞中富集了CD24?/CD44+細(xì)胞，這是乳腺CSC樣細(xì)胞的分子特征。進(jìn)一步地，作者發(fā)現(xiàn)hRNase1不依賴于核糖核裂變活性的功能就可以豐富乳腺CSC樣細(xì)胞的數(shù)量，提高腫瘤產(chǎn)生能力。沉默hRNase 1可以減少乳腺CSC樣細(xì)胞的數(shù)量，并降低腫瘤產(chǎn)生能力。

基于上述結(jié)論，作者開始探討hRNase1的分泌機(jī)制及其對腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)影響。作者使用重組hRNase1蛋白進(jìn)行處理增加了海拉細(xì)胞中的EphA4、HGFR和Tie-2的酪氨酸磷酸化以及BT-549細(xì)胞中EphA4、EphA10和ROR2酪氨酸磷酸化。于是，作者開始關(guān)注hRNase1是否能影響EphA4通路。結(jié)果表明，hRNase1直接與EphA4結(jié)合，作為配體誘導(dǎo)EphA4下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。之后，作者發(fā)現(xiàn)，hRNase1與EphA4之間的相互作用是通過hRNase1的C端相結(jié)合并且需要EphA4的配體結(jié)合域幫助。

接下來，作者對hRNase1和EphA4之間的配體-受體關(guān)系特征進(jìn)行了進(jìn)一步的研究，并將只與經(jīng)典的膜相關(guān)ephrin配體進(jìn)行比較。首先，作者證明了hRNase 1誘導(dǎo)EphA4二聚/齊聚。之后，作者發(fā)現(xiàn)hRNase1直接特異性介導(dǎo)EphA4激活，而不是通過增加經(jīng)典ephrin配體的表達(dá)水平來間接影響。有研究表明EphA4下游信號分子，如NF-κB、Erk、Src和Akt，在不同類型的細(xì)胞中被活化以響應(yīng)ephrin-EphA 近泌性信號?；诖耍髡甙l(fā)現(xiàn)在表達(dá)hRNase1的BT-549細(xì)胞中，NF-κB活化程度明顯高于對照組。hRNase1通過IKK/NF-κB和MEK/Erk激活通路誘導(dǎo)球狀體形成。EphA4正向調(diào)控hRNase 1介導(dǎo)的乳腺腫瘤起始和腫瘤發(fā)生。并且，hRNase 1水平、EphA4活化和干細(xì)胞樣細(xì)胞群之間的正相關(guān)支持了hRNase 1 - EphA4軸在腫瘤起始過程中的病理相關(guān)性，這對乳腺癌治療具有潛在的臨床意義。

乳腺癌檢測標(biāo)志物

乳腺癌屬于女性高發(fā)癌癥，發(fā)病率位居各類癌癥前列，乳腺癌發(fā)病高峰為45～60歲，近年呈現(xiàn)年輕化的趨勢。隨著乳腺癌預(yù)后研究的深入，越來越多的預(yù)后標(biāo)志物被人們發(fā)現(xiàn)，部分已經(jīng)應(yīng)用于臨床作為乳腺癌分子分型的依據(jù)，如雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）和原癌基因Her2均為陰性的三陰性乳腺癌標(biāo)志物，往往提示患者預(yù)后較差?，F(xiàn)根據(jù)生物標(biāo)志物進(jìn)行分子分型的乳腺癌有十幾種，這些標(biāo)志物可以檢測乳腺癌的發(fā)生或者復(fù)發(fā)。云克隆提供多個(gè)膀胱癌檢測標(biāo)志物的蛋白、抗體以及ELISA試劑盒產(chǎn)品，廣泛的應(yīng)用于人、小鼠、大鼠、豬、羊等多個(gè)物種的檢測。