2022年2月17日，清華大學藥學院Bai Lu團隊在《NATURE COMMUNICATIONS》上發(fā)表題為“TrkB agonist antibody ameliorates fertility deficits in aged and cyclophosphamide-induced premature ovarian failure model mice”的文章，確定了TrkB 激動劑抗體可用于卵巢早衰臨床治療。

在這篇文章中，云克隆試劑盒【雌二醇(E2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)，CEA461Ge；促卵泡素(FSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)，CEA830Mu】受到科研工作者的認可，榮登優(yōu)秀國際期刊。

研究簡介

卵巢早衰(POF)是一種主要的人類不孕癥。患有POF的婦女不僅會出現(xiàn)不孕不育，還會出現(xiàn)心理困擾、骨質疏松、自身免疫性疾病、缺血性心臟病等嚴重并發(fā)癥。目前，對于POF尚無有效的治療方法。腦源性神經營養(yǎng)因子 (BDNF) 是一種廣泛研究的神經營養(yǎng)因子，現(xiàn)在也被稱為卵巢內分泌因子。BDNF的受體TrkB在卵巢組織中表達。BDNF-TrkB信號傳導是體內卵泡生長和卵母細胞存活所必需的。盡管 BDNF-TrkB 信號通路失調與 POF 之間存在關聯(lián)，但研究表明，BDNF 本身不能用作藥物，因為它的藥代動力學差、擴散性有限以及激活另一種受體引起不同的作用等。因此，作者試圖靶向 TrkB 開發(fā)用于治療 POF的藥物。

作者首先檢查 TrkB 激動劑抗體 Ab4B19 是否可以進入卵巢卵泡并激活TrkB 信號傳導。結果顯示Ab4B19 可以以時間依賴性方式滲透到卵泡中。與 BDNF相似，Ab4B19有效地增加卵母細胞減數(shù)分裂，并且這種效應可以被 Trk受體抑制劑阻斷。他們進一步確定 Ab4B19 是否可以在生理條件下促進卵母細胞排卵。在用 Ab4B19 處理發(fā)情前期成年小鼠后，與對照組相比，Ab4B19 處理組的黃體更多，表明 Ab4B19 促進了卵母細胞成熟。此外，Ab4B19 顯著促進竇卵泡發(fā)育，但不促進原始卵泡和前竇卵泡。

為了確定 Ab4B19 是否可用于 POF 治療，作者使用自然老化 POF 模型 (NA-POF)進行實驗。Ab4B19 給藥糾正了NA-POF小鼠中斷的發(fā)情周期，改善卵巢的形態(tài)并增加了卵泡數(shù)量，減少閉鎖卵泡，增加黃體的數(shù)量，并恢復竇前卵泡和竇卵泡的發(fā)育，而不影響原始卵泡。用 Ab4B19 治療也逆轉了血液 E2 激素的異常，阻止 NA-POF 小鼠卵巢退化。同時，施用 Ab4B19增加了排卵的卵母細胞數(shù)量，降低了NA-POF小鼠異常卵母細胞的比例。與未處理的 NA- POF 相比，用 Ab4B19 處理的 NA-POF 小鼠與正常雄性小鼠交配后，擁有更多的胚胎，顯示出更高的妊娠能力。這些結果共同證明了 Ab4B19 在 NA-POF 模型中對生育力的有益影響。

環(huán)磷酰胺 (Cy) 是一種常用的化療藥物，可導致嚴重的卵巢損傷，并且是公認的 POF 風險因素。作者使用 Cy 誘導的小鼠模型 (Cy-POF) 來評估 Ab4B19 在 Cy 誘導后對保留原始卵泡的治療效果。Ab4B19 治療顯著減輕 Cy 誘導的卵泡損傷，使其正常發(fā)育。Ab4B19 還逆轉 Cy 誘導的閉鎖卵泡增加，卵巢中竇前和早期竇期的凋亡指數(shù)得到改善。Cy 誘導的卵巢損傷伴隨著 FSH 的增加，E2 激素的減少。Ab4B19 治療將這兩種激素的水平逆轉至接近正常水平。此外，Cy-POF 小鼠表現(xiàn)出排卵卵母細胞數(shù)量減少和異常卵母細胞比例增加，并且用 Ab4B19 治療也逆轉了這些變化。進行交配試驗后，他們發(fā)現(xiàn)與對照小鼠相比，Cy-POF 小鼠的窩產仔數(shù)減少，可被 Ab4B19 處理逆轉。

最后，作者在人卵巢顆粒細胞癌 KGN 細胞系中驗證Ab4B19 的效用。作者發(fā)現(xiàn) Ab4B19 促進了 KGN 細胞的存活。將 Ab4B19 應用于培養(yǎng)的 KGN 細胞也刺激了CREB 磷酸化。為了進一步探索 POF 中 TrkB 激活的臨床相關性，作者進行單細胞 RNA-seq 實驗，以檢測人卵巢濾泡中的 BDNF 和 TrkB mRNA 表達。發(fā)現(xiàn)與 BDNF 類似，用 Ab4B19 處理引起磷酸化 Erk 的顯著增加，這是 TrkB 激活的敏感下游信號，提示Ab4B19 可離體激活人卵巢組織中的 TrkB 信號傳導。

綜上所述，Ab4B19 不僅可以延長和增強自然衰老小鼠的生殖能力，還可以保護 Cy 治療小鼠的生育能力并修復發(fā)育中的卵泡損傷。 這些結果確定了TrkB 激動劑抗體 Ab4B19是一個潛在的治療藥物，可用于臨床治療POF，逆轉不孕癥。