干燥綜合征(SS)是一種自身免疫性疾病，其特征在于外分泌腺的慢性炎癥和針對(duì)核糖核蛋白顆粒SSA/Ro和SSB/La的自身抗體的存在。臨床特征是眼睛干澀（干燥性角膜結(jié)膜炎）和口干。由于其他器官受累，SS也有多種全身表現(xiàn)。盡管SS可能涉及環(huán)境和遺傳因素的組合，但人們對(duì)導(dǎo)致該疾病的致病機(jī)制知之甚少。由于病因不明，SS僅存在姑息治療，未能改善SS患者的生活質(zhì)量。更好地了解病理生理學(xué)對(duì)于開發(fā)一種改善SS的疾病治療方法至關(guān)重要。

1. 青蒿琥酯通過抑制IRF4介導(dǎo)的糖酵解抑制Th17反應(yīng)并改善SS

Th17細(xì)胞被認(rèn)為是SS疾病發(fā)生和延續(xù)的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因素。先前的研究表明，青蒿素的重要衍生物青蒿琥酯(ART)可調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)炎大鼠的Th17和調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞平衡。香港大學(xué)深圳醫(yī)院病理學(xué)系LiweiLu團(tuán)隊(duì)探討ART對(duì)SS疾病發(fā)展的作用^[1]。在誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性SS的小鼠中，ART的施用顯著降低了SS疾病進(jìn)展過程中包括抗SSA IgG在內(nèi)的自身抗體的血清水平，減少了Th17細(xì)胞，減輕了唾液腺炎癥。IRF4是T細(xì)胞分化和功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。在Th17細(xì)胞中，Glut1的水平與IRF4表達(dá)相關(guān)。ART治療顯著降低了人和鼠Th17細(xì)胞中的IRF4水平。機(jī)制分析顯示，ART顯著增加了連鎖特異性K48泛素的水平，該泛素主要靶向IRF4+Th17細(xì)胞中蛋白酶體降解的蛋白質(zhì)。這提示ART通過促進(jìn)IRF4的蛋白酶體降解來抑制Th17糖酵解的新代謝調(diào)節(jié)功能(圖1)。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)表明ART可能作為SS的潛在治療藥物。

2. 全基因組關(guān)聯(lián)研究確定SS的風(fēng)險(xiǎn)基因座

確定SS的遺傳風(fēng)險(xiǎn)將為了解影響疾病發(fā)病機(jī)制的失調(diào)分子機(jī)制提供重要見解，并促進(jìn)新治療方法的開發(fā)以改善早期診斷和治療。美國基因和人類疾病研究計(jì)劃俄克拉荷馬醫(yī)學(xué)研究基金會(huì)ChristopherJ.Lessard團(tuán)隊(duì)對(duì)歐洲血統(tǒng)的SS患者進(jìn)行了迄今為止最大的GWAS研究，從而確定了10個(gè)新的GWS關(guān)聯(lián)基因：CD247、NAB1、PTTG1-MIR146A、PRDM1-ATG5、TNFAIP3、XKR6、MAPT-CRHR1、RPTOR-CHMP6-BAIAP6、TYK2、SYNGR1^[2]。使用基因分型的SNP，他們還評(píng)估了與相關(guān)自身免疫疾病的遺傳相關(guān)性以及多基因風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分分析預(yù)測(cè)疾病的能力(圖2)。在免疫細(xì)胞類型特異性eQTLs的背景下評(píng)估每個(gè)區(qū)域的局部調(diào)控網(wǎng)絡(luò)顯示，大多數(shù)區(qū)域具有廣泛的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共同涉及索引基因上游和下游的>40個(gè)基因。此外，這些擴(kuò)展的局部調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中基因的通路分析具有不同的功能潛力，并且可能通過改變細(xì)胞功能來影響疾病的發(fā)病機(jī)制。

3. 在SS中HSP70的溶酶體胞吐作用刺激單核細(xì)胞BMP6的表達(dá)

BMP6是誘導(dǎo)SS相關(guān)分泌功能減退的中心細(xì)胞因子。美國國立衛(wèi)生研究院AAV生物學(xué)研究室JohnA.Chiorini團(tuán)隊(duì)對(duì)取自SS患者的唾液腺切片的分析表明單核細(xì)胞系細(xì)胞是BMP6的細(xì)胞來源^[3]。人類唾液腺的RNA-Seq數(shù)據(jù)表明，TLR4信號(hào)傳導(dǎo)是BMP6的上游調(diào)節(jié)因子。進(jìn)一步研究表明，HSP70是一種內(nèi)源性天然TLR4配體，可刺激SS中的BMP6表達(dá)。上皮細(xì)胞釋放HSP70可能是由溶酶體相關(guān)膜蛋白3(LAMP3)的過表達(dá)觸發(fā)的，該蛋白在多項(xiàng)轉(zhuǎn)錄組研究中也與SS相關(guān)。體外研究支持這一觀點(diǎn)，即HSP70是由于LAMP3表達(dá)引發(fā)的溶酶體胞吐作用而釋放的，并且對(duì)來自SS患者小唾液腺的RNA的逆轉(zhuǎn)錄PCR證實(shí)了BMP6和LAMP3表達(dá)之間的正相關(guān)。BMP6的表達(dá)可以通過LAMP3的過表達(dá)在小鼠中實(shí)驗(yàn)性地誘導(dǎo)，從而形成SS樣表型。新發(fā)現(xiàn)的LAMP3/HSP70/BMP6軸為SS腺體功能障礙和自身免疫提供了病因模型(圖3)。

4. 體內(nèi)產(chǎn)生SSA/Ro抗原特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可改善小鼠的實(shí)驗(yàn)性SS

T細(xì)胞在SS疾病的發(fā)生和持續(xù)發(fā)展中起重要作用。美國國立衛(wèi)生研究院口腔與顱面研究所粘膜免疫學(xué)研究室WanJunChen團(tuán)隊(duì)通過將CD4+T細(xì)胞的瞬時(shí)耗竭與自身抗原特異性肽Ro480的施用相結(jié)合，開發(fā)了一種用于SS樣NOD/Ltj小鼠的免疫療法^[4]。NOD/Ltj小鼠用單抗CD4mAb治療，2天后每隔一天連續(xù)6次注射Ro480-494。anti-CD4mAb與自身抗原特異性肽Ro480聯(lián)合在體內(nèi)產(chǎn)生SSA/Ro抗原特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，可抑制唾液腺中CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ和炎癥浸潤，維持唾液腺功能(圖4)。這項(xiàng)研究結(jié)果提供了一種在體內(nèi)產(chǎn)生用于SS治療的抗原特異性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的新方法，可能對(duì)SS患者的潛在治療產(chǎn)生影響。

參考文獻(xiàn)

[1]Xiao F, Rui K, Han M, et al. Artesunate suppresses Th17 response via inhibiting IRF4-mediated glycolysis and ameliorates Sjog?ren's syndrome. Signal Transduct Target Ther. 2022;7(1):274.(IF=38.104)

[2]Khatri B, Tessneer KL, Rasmussen A, et al. Genome-wide association study identifies Sj?gren's risk loci with functional implications in immune and glandular cells. Nat Commun. 2022;13(1):4287. (IF=17.694)

[3]Mo YQ, Nakamura H, Tanaka T, et al. Lysosomal exocytosis of HSP70 stimulates monocytic BMP6 expression in Sj?gren's syndrome. J Clin Invest. 2022;132(6):e152780.(IF=19.456)

[4]Xu J, Liu O, Wang D, et al. In vivo generating SSA/Ro-antigen specific regulatory T cells improves experimental Sj?gren's syndrome in mice. Arthritis Rheumatol. 2022;10.1002/art.42244. (IF=15.483)

云克隆不僅可提供多種自身免疫疾病動(dòng)物模型，包括干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病等，涵蓋常見自身免疫疾病；還具有各類自身免疫疾病檢測(cè)指標(biāo)及上述SSA、SSB、IRF4、Glut1、BMP6、TLR4、LAMP3、HSP70等相關(guān)產(chǎn)品，可助力廣大科研工作者進(jìn)行自身免疫疾病研究。