-
IL10活性蛋白可抑制LPS刺激的THP1細(xì)胞產(chǎn)生IL1β
查看詳情白介素10（IL10），又被稱為細(xì)胞因子合成抑制因子（CSIF），是一種抗炎因子。IL10是一種多細(xì)胞源、多功能的細(xì)胞因子 ，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與分化，參與炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)，是公認(rèn)的炎癥與免疫抑制因子。據(jù)報道，IL10可以抑制細(xì)胞因子的分泌，抑制單核巨噬細(xì)胞的抗原提呈作用。實驗原理：IL10主要抑制脂多糖（LPS）介導(dǎo)的由巨噬細(xì)胞和Th1細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子TNFα、IL1β、IL12和IFNγ的分泌。為驗證IL10活性蛋白的活性，本實驗通過LPS刺激THP1細(xì)胞產(chǎn)生IL1β，通過對比IL10對IL1β分泌的抑制作用，以評價IL10活性蛋白的活力。實驗過程：將......
-
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性蛋白
查看詳情云克隆推出了三大物種科研用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性蛋白產(chǎn)品，以期為助力科研盡綿薄之力。云克隆ACE2相關(guān)活性蛋白產(chǎn)品CatalogSpeciesProductAPB886Hu01HumanActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Mu01MouseActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Ra01RatActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APX273Ge02Pan-speciesActive Spike Protein (SP)以人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2，ACE2（APB886Hu01）活性蛋白為例，活性驗證方案如下：實驗原理：SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白（SP）可通過......
-
什么是中和抗體，該怎么檢測？
查看詳情最近，在新冠疫情中想必大家總是聽到一個專有名詞——中和抗體，它是什么呢？和普通抗體有什么區(qū)別呢？在病毒學(xué)中，中和抗體（Nautralizing Antibody, ）首先是抗體，它在抗體這個層面上和普通抗體的概念重合，是機體免疫細(xì)胞被抗原激活后，由B淋巴細(xì)胞分化的漿細(xì)胞分泌的，能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。除此之外，中和抗體顯然還應(yīng)該有專門針對“中和”的更進一層的含義，這里的中和是指該抗體能和病毒結(jié)合，進而阻斷病毒感染。這種阻斷能力主要通過三種方式來實現(xiàn)：1.阻斷病毒與細(xì)胞表面受體的結(jié)合；2.阻斷病毒侵入細(xì)胞；3.阻......
-
活性蛋白——IFN-γ的細(xì)胞刺激實驗
查看詳情干擾素γ（IFN-gama）是一種多功能蛋白，IFN-γ由T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞產(chǎn)生，它既是一種高效的抗病毒生物活性物質(zhì)，又是一種具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用的淋巴因子。IFN-γ還能活化中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞合成的黏附分子，促進Th1細(xì)胞發(fā)育并抑制Th2細(xì)胞活化與增殖。實驗方案：據(jù)報道，IFNγ是人單核THP1細(xì)胞的重要激活因子。因此，我們選用THP-1細(xì)胞作為待刺激細(xì)胞，用不同濃度的IFNγ與THP1細(xì)胞在RPMI-1640培養(yǎng)基中共培養(yǎng)5天，在顯微鏡下每天觀察THP-1細(xì)胞的形態(tài)。實驗結(jié)果：A.THP1細(xì)胞在RPMI-1640培養(yǎng)基中以5ng/ml IFN-γ......
-
肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶活性實驗
查看詳情肽酰甘氨酸α-酰胺化單加氧酶（Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase, PAM）是多種多肽產(chǎn)生生物活性所必需的酶。它含有兩個具有催化活性的酶活性域：肽基甘氨酸α-羥基化單加氧酶（PHM）和肽基-α-羥基甘氨酸α-酰胺化裂解酶（PAL）。這些催化結(jié)構(gòu)域依次作用于將神經(jīng)內(nèi)分泌肽催化為活性的α-酰胺化產(chǎn)物。通常，將Dns-Tyr-Val-Gly底物水解為Dns-Tyr-Val-NH2作為PAM的典型活性測定法。實驗方法：1.在1mL含100mM MES / KOH（pH 6.0）、30mM KI，30mM KCl，1μmol/ L硫酸銅，100ug / mL過氧化氫酶，1％（v / v）乙醇，0.001％（v /......
-
PNGase F活性測定
查看詳情實驗原理肽-N-糖苷酶F（PNGase F），可以在N-連接糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分最內(nèi)側(cè)的N-乙酰葡萄糖胺和天冬酰胺殘基之間進行切割。本試驗以真核表達的重組Interferon Gamma（IFNg）蛋白為底物來測定重組肽-N-糖苷酶F的活性。實驗試劑及儀器試劑：10×變性緩沖液：5% SDS，400mM DTT反應(yīng)緩沖液：50mmol/L Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40儀器：SDS-PAGE電泳儀實驗步驟將真核蛋白Interferon Gamma（IFNg）用1×變性緩沖液稀釋成1μg/μL，在100℃煮沸10min使其變性。將重組蛋白PNGase F用反應(yīng)緩沖液從1000ng/mL開始進行兩倍稀......
-
蛋白活性實驗-SOD3活性蛋白
查看詳情實驗原理Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)，是SOD同工酶的一種。SOD3以Cu2+、Zn2+為輔基，屬于CuZn SOD，可以消除體內(nèi)代謝產(chǎn)生的反應(yīng)氧族，抵御內(nèi)外環(huán)境中超氧離子的損傷。由于超氧陰離子自由基O2 - 壽命短，不穩(wěn)定，不易直接測定SOD活性，而采用間接的方法。本實驗采用鄰苯三酚自氧化法來間接測定，SOD的活性。鄰苯三酚在堿性條件下能迅速自氧化，生成有色中間產(chǎn)物，在325nm下吸光值增加，加入SOD酶后能抑制其自氧化的速率，從而間接測定SOD酶的活性。實驗試劑及儀器試劑：50mmol/L Tris-HCl，pH8.250mmol/L 鄰苯三酚......
-
Caspase-3活性檢測
查看詳情實驗原理Caspase-3是一種蛋白酶，屬于半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族，在細(xì)胞凋亡中起著不可替代的作用。caspase-3可以被多種因素活化，在CTL細(xì)胞的殺傷作用中，它既可被Fas/FasL途徑活化，也可以通過顆粒酶B途徑活化。顆粒酶B是CTL細(xì)胞顆粒中的一種絲氨酸酯酶，是哺乳動物中除caspase蛋白酶外唯一的在Asp后剪切的蛋白酶，它可以特異性剪切ICE家族蛋白酶催化亞單位C端的XXD序列，并活化caspase 2、3、6、7、8、9、10。Caspase-3能催化特異性底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA)水解生成對硝基苯胺,通過......