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多因子試劑盒標(biāo)曲擬合
多因子檢測(cè)技術(shù)是一種基于流式熒光法的多重檢測(cè)技術(shù),一次實(shí)驗(yàn)可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)分子,適用于蛋白質(zhì)、小分子、多肽等靶標(biāo)的檢測(cè)。相比傳統(tǒng)的單因子檢測(cè)方法,多因子檢測(cè)技術(shù)具有高通量、高靈敏度和特異性好的特點(diǎn),同時(shí)還能節(jié)省樣本,提高檢測(cè)效率,有著廣泛的應(yīng)用前景。流式熒光法多因子檢測(cè)的免疫學(xué)原理與普通酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)相似,但信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)有所不同。多因子檢測(cè)也可以分為雙抗夾心和競(jìng)爭(zhēng)法。雙抗夾心法是通過將已知的抗體偶聯(lián)在熒光微球表面,待測(cè)抗原與偶聯(lián)的抗體反應(yīng),加入生物素化的檢測(cè)抗體,形成雙抗夾心的結(jié)構(gòu),最......
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細(xì)胞微囊泡——外泌體
外泌體是一種直徑為30至150nm的膜分泌型囊泡狀結(jié)構(gòu),其拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)與細(xì)胞類似,并富含特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和多糖復(fù)合物。這些微小的細(xì)胞器由幾乎所有類型的細(xì)胞產(chǎn)生并釋放,自然存在于多種體液中,如腦脊液、唾液、肺泡灌洗液、乳汁、尿液和血液等。外泌體的生成過程是通過細(xì)胞膜上的出芽方式進(jìn)行的,其中含有一系列與細(xì)胞膜密切相關(guān)的高階寡聚蛋白復(fù)合物,展現(xiàn)出顯著的分子異質(zhì)性。這一過程不僅是蛋白質(zhì)質(zhì)量控制的重要機(jī)制,而且外泌體在釋放到細(xì)胞外后,具備多重生物活性,如重塑細(xì)胞外基質(zhì)、向其他細(xì)胞傳遞信號(hào)和分子等。這種......
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HepG2-luc穩(wěn)定細(xì)胞系助力實(shí)驗(yàn)研究
熒光素酶(luciferase)在一定條件下可以催化熒光素(luciferin),產(chǎn)生自發(fā)光現(xiàn)象(如圖1)。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱。目前比較常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶,海螢熒光素酶等。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶組成的雙報(bào)告系統(tǒng)在基因的表達(dá)調(diào)控、信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用、高通量藥物篩選、siRNA和miRNA篩選等多個(gè)研究領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。 圖1. 熒光素酶與熒光素的發(fā)光反應(yīng)螢火蟲熒光素酶是目前研究中使用最為廣泛的熒光素酶。它由550個(gè)氨基酸組成,翻譯......
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云克隆教你出完美Western Blot條帶
在Western Blot(WB)的實(shí)驗(yàn)過程中,總會(huì)遇到各種各樣的問題:沒有條帶,雜帶多,轉(zhuǎn)膜不成功,曝光時(shí)間把握不好……WB實(shí)驗(yàn)周期長,操作步驟繁瑣。怎么在繁瑣的操作中快速找到問題所在是很多科研人員頭疼的問題。不要急,云克隆用多年積攢的WB實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),為你分析解決WB實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的各種狀況。一、SDS-PAGE出現(xiàn)異常條帶1. 微笑現(xiàn)象可能原因:凝膠的中間部分凝固不均導(dǎo)致。解決辦法:待其充分凝固后再做實(shí)驗(yàn)。2.拖尾現(xiàn)象可能原因:樣品融解效果不佳;電泳緩沖液時(shí)間過長;分離膠濃度過大引起。解決辦法:加樣前離心;加適量樣品促溶......
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除疤大作戰(zhàn) — 減少疤痕形成的新思路
疤痕很常見,在生活中磕磕碰碰就可能留下疤痕。然而疤痕一旦形成,則很難去除,目前醫(yī)學(xué)界仍無法完全消除疤痕。近期,有篇關(guān)于減少疤痕形成的研究登陸國際頂級(jí)期刊《Nature Communications》,為除疤提供了新的思路。 內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)是導(dǎo)致器官組織纖維化和疾病的主要原因,然而其機(jī)制尚未闡明。內(nèi)皮細(xì)胞具有強(qiáng)大的適應(yīng)和重組的再生能力,這是由于血管內(nèi)祖細(xì)胞(EVP)控制著內(nèi)皮細(xì)胞的層次結(jié)構(gòu)。通過分析,研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子SOX9和RBPJ特異性地影響小鼠EVP的數(shù)量和調(diào)節(jié)譜系特化。當(dāng)從小鼠血管系統(tǒng)(Sox9fl......
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抑郁癥—致命的“心理感冒”
根據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization, WHO)的統(tǒng)計(jì),目前全球有超過3億人飽受抑郁的困擾。抑郁是一種情緒低落和悲觀厭世的狀態(tài),就如同心理患上感冒,其主要癥狀表現(xiàn)為情緒低落、抑郁悲觀、反應(yīng)遲鈍、思考困難、記憶力下降、注意力不集中、食欲和睡眠時(shí)間顯著增加或減少等。而當(dāng)“心理感冒”加重時(shí),患者會(huì)感到沮喪、絕望,甚至?xí)壬詺⒌哪铑^。每年有百萬人因抑郁致死,且因抑郁癥死亡的人數(shù)呈逐年增長的趨勢(shì),抑郁癥目前已成為僅次于癌癥的第二大殺手。圖1. 21種抗抑郁藥的療效及耐受度坐標(biāo)圖(圖片來源:《Nature Neuros......
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與免疫細(xì)胞并肩作戰(zhàn)的逆行者
當(dāng)機(jī)體受到外來入侵者攻擊時(shí),由免疫細(xì)胞組成的免疫系統(tǒng)能夠有效的防御外來入侵者。大家可能不知道,除了免疫細(xì)胞們,機(jī)體內(nèi)抵御病原體的逆行者們還有這幾種結(jié)構(gòu)細(xì)胞——成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。這些結(jié)構(gòu)細(xì)胞不僅僅是器官的支架,它們還能與免疫細(xì)胞進(jìn)行交流,參與抗病毒防御。Krausgruber等人在《自然》雜志上報(bào)道了一項(xiàng)對(duì)小鼠體內(nèi)多器官結(jié)構(gòu)細(xì)胞基因表達(dá)的檢測(cè),揭示了這些細(xì)胞在機(jī)體防御外來入侵者的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中的作用,且結(jié)構(gòu)細(xì)胞對(duì)外來入侵者的防御反應(yīng)具有器官特異性。圖1通過分析發(fā)現(xiàn),小鼠體內(nèi)的成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞......
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瘦不下來?原來是它在使壞。
工作生活加班加點(diǎn),身上肥肉只增不減,沒邁開腿?沒管住嘴?還是天要胖我,不得不胖?罪魁禍?zhǔn)卓赡苁墙裉斓闹鹘恰べ|(zhì)醇。皮質(zhì)醇,也稱為“氫化可的松”,是腎上腺素分泌的糖皮質(zhì)激素,作為一種“應(yīng)激激素”,當(dāng)人體遇到危險(xiǎn)和緊急情況時(shí),腎上腺素會(huì)瞬間分泌大量皮質(zhì)醇,促進(jìn)糖原分解消耗,生成葡萄糖,迅速給機(jī)體補(bǔ)充能量。不僅如此,它還能調(diào)節(jié)血壓、控制睡眠周期、提升注意力和記憶力。正常情況下,皮質(zhì)醇代謝有著固定的生理節(jié)奏(圖1),24小時(shí)一個(gè)周期,早晨6點(diǎn)到8點(diǎn)水平最高,上午8點(diǎn)到12點(diǎn)其水平會(huì)大幅度下降,之后持續(xù)地緩慢下......